TY - JOUR ID - 2065 TI - بیان فاکتور رشد استخوانی نوترکیب انسانی2 (rhBMP2) در ریشه‌های موئین تراریخت توتون JO - مجله بیوتکنولوژی کشاورزی JA - JAB LA - fa SN - 2228-6705 AU - دهقانی, بلال AU - موسوی, امیر AU - حسن نیا, صادق AU - هاتف سلمانیان, علی AU - شرفی, علی AU - افتخاریان قمصری, محمد رضا AD - کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران. AD - دانشیار، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران. AD - دانشیار، دانشکده علوم زیستی ، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران. AD - استاد، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران. AD - استادیار، دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی زنجان، ایران. AD - مربی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران. Y1 - 2018 PY - 2018 VL - 10 IS - 1 SP - 21 EP - 34 KW - پروتئین نوترکیب KW - BMP KW - کشاورزی مولکولی KW - توتون KW - ریشه موئین KW - کلزا DO - 10.22103/jab.2018.2065 N2 - با توجه به افزایش جمعیت جهان، امروزه تقاضا برای تولید پروتئین­های نوترکیب در بافت­های گیاهی در حال افزایش است.  ریشه­های موئین بخاطر زیست توده و ثبات ژنتیکی بالا به عنوان بافت هدفی مناسب مدنظر می باشند. گلیکوپروتئین تنظیمی BMP2، به عنوان یکی از مهمترین فاکتورهای رشد با کاربرد درمانی و تحقیقاتی در مهندسی بافت مطرح می­باشد. انتخاب میزبان گیاهی مناسب، بافت مطلوب و سازه ژنی مناسب، از عوامل مهم در بالا بردن میزان تولید پروتئین نوترکیب است. در راستای حصول این هدف، در مطالعه حاضر تولید پروتئین نوترکیبBMP2  در ریشه­های مویینه تراریخت گیاهان توتون و کلزا مورد بررسی قرار گرفت.  برای تهیه سازه ژنی، در بالادست ژن BMP2، توالی­هایUTR) TMV (5′و KOZAK  جهت افزایش بیان و در پایین دست ژن، توالی شش تایی هیستیدینی جهت تخلیص پروتئین و توالیKDEL  بعنوان سیگنال نگهدارنده پروتئین درشبکه اندوپلاسمی تعبیه شدند. این توالی ژنی تحت کنترل پیشبرنده  CaMV 35Sبیان شد. برای انتقال سازه ژنی مذکور به ریز نمونه­های برگی توتون یک ماهه به عنوان گیاه مدل و انتهای کوتیلدونی کلزا شش روزه به عنوان یک گیاه زراعی از باکتری Agrobactrium rhizogenes استفاده گردید. پس از رشد ریشه های موئین و غربالگری آن ها به روش PCR ، تایید درسطح رونویسی با روش RT-PCR انجام گرفت. در عین حال، تایید بیان پروتئین نوترکیب در میزبان با روش های آزمون الایزا و لکه گذاری وسترن صورت پذیرفت. نتایج این تحقیق بیان گر کارایی بالای سیستم ریشه های مویینه برای تولید فاکتورهای نوترکیب درمانی می­باشد، که استفاده از آنها را در رآکتورهای زیستی مطرح می سازد. UR - https://jab.uk.ac.ir/article_2065.html L1 - https://jab.uk.ac.ir/article_2065_c008820d2d85cc0672347eb6d475a03f.pdf ER -