دانشگاه شهید باهنر کرمان (دانشکده کشاورزی و پژوهشکده فناوری تولیدات گیاهی) و انجمن بیوتکنولوژی جمهوری اسلامی ایران مجله بیوتکنولوژی کشاورزی 2228-6705 16 3 2024 09 22 Measuring the relative expression pattern of the UCP2 gene in different tissues of the Raini Cashmere goat اندازه گیری الگوی بیان نسبی ژن UCP2 در بافت‌های مختلف بز کرکی راینی 317 332 4524 10.22103/jab.2024.24337.1627 FA محمدرضا محمدآبادی استاد بخش علوم دامی دانشگاه شهید باهنر کرمان اولنا بابنکو ایوانیونا بخش علوم دامی، دانشگاه ملی کشاورزی بیلا تسرکوا، بیلا تسرکوا، اکراین. الکساندر بورشچ دانشگاه ملی کشاورزی بیلا تسرکوا، بیلا تسرکوا، اوکراین الکساندر کلاشنیک دانشگاه ملی کشاورزی سومی، سومی، اوکراین یولیا ایوستافیوا دانشیار، گروه فناوری‌های تولید و فرآوری دام، دانشگاه دولتی پودیلیا، اوکراین ویتا بوچکوفسکا دانشیار، گروه فناوری های تولید و فرآوری دام، دانشگاه دولتی پودیلیا، اوکراین Journal Article 2024 11 08 <strong>Objective</strong><br />The Raini cashmere goat is one of the most momentous Iranian goat breeds. These animals are bred for production of not only cashmere but also meat. Factors such as lipid peroxidation, oxidative stress, and changes in membrane properties are among the factors that cause the death of germ cells at different stages of development and ultimately have a negative effect on production and reproduction. To investigate this process, the UCP2 gene, a protein from the inner membrane of the mitochondrial organelle that pertains to uncoupling proteins family that performs a dominant function in reducing the membrane potential of the mitochondrial organelle and the loss of metabolic energy by preventing the accumulation of oxidative stress, was studied. Moreover, this gene is implicated in the physiology of several tissues, and the dominant isoform of its unconjugated proteins performs a dominant function in preventing inflammation and inhibiting cell death. The goal of the present study was therefore to consider the relative expression level of the UCP2 gene in several tissues of the Raini cashmere goat applying the Real-Time PCR technique.<br /><strong>Materials and Methods</strong><br />For this purpose, samples of humeral muscle, back muscle, femur muscle, spleen, heart, testis, liver and back fat tissues (three replicates of each tissue) were collected from four Raini cashmere goats of approximately the same weight at the time of slaughter. Total RNA of these tissues was extracted and their cDNA amplified. Real-Time PCR reaction using the non-specific SYBR Green dye method was performed to examine the relative gene expression. In this study, the GAPDH gene was used as an internal control. Prism software was applied to analyze the raw data, analyze the data got from Real-Time PCR and calculate the extent of changes in gene expression.<br /><strong>Results </strong><br />The results of current investigation showed that the UCP2 gene was expressed in all tissues examined, with the highest expression level in the humeral muscle tissue (9.5-fold) and back muscle (4.5-fold), while the lowest expression level was observed in the back fat tissue (1.3-fold) and liver (1.5-fold) (P<0.01).<br /><strong>Conclusions</strong><br />Considering that the UCP2 gene was expressed in all tissues examined and showed different expression levels in the different tissues, it could be inferred that this gene performs a function in different mechanisms and activities. Therefore, by conducting further experiments and understanding the relevant mechanisms, the cause of the change in expression can be found and action can be taken to improve livestock performance by changing the expression of this gene.   <strong>هدف: </strong>بز کرکی راینی یکی از مهمترین نژادهای بز در ایران است. این حیوانات هم برای تولید گوشت و هم برای تولید کرک نگهداری می­شوند. عواملی همچون استرس اکسیداتیو، پراکسیداسیون لیپیدها و تغییر خاصیت‌های غشایی از جمله عواملی هستند که باعث مرگ سلول‌های زایا در مراحل مختلف نمو می‌شوند و نهایتا پیامدهای منفی بر تولید و تولیدمثل دارند. در راستای مطالعه این روند، ژن UCP2 پروتئینی از غشای داخلی اندامک میتوکندری و متعلق به خانواده پروتئین‌های غیر مزدوج است که نقش مهمی در کاهش پتانسیل غشای اندامک میتوکندری و اتلاف انرژی متابولیک با جلوگیری از تجمع استرس اکسیداتیو دارد. همچنین، این ژن در فیزیولوژی بافت‌های مختلف دخیل است و ایزوفرم غالب پروتئین‌های غیر مزدوج آن نقش مهمی در مهار التهاب و مهار مرگ سلولی دارد. از این‌رو، هدف از پژوهش حاضر بررسی میزان بیان نسبی ژن UCP2 در بافت‌های مختلف بز کرکی راینی با استفاده از تکنیک Real Time PCR بود.<br /><strong>مواد و روش‌ها:</strong> بدین‌منظور، نمونه‌برداری از بافت‌های عضله سردست، راسته، ران، قلب، بیضه، کبد و چربی پشت کمر (از هر بافت 3 تکرار) چهار رأس بز کرکی راینی با وزن تقریباً یکسان در زمان کشتار انجام شد. RNA کل بافت‌های عضله سردست، راسته، ران، قلب، بیضه، کبد و چربی پشت کمر استخراج و cDNA آن‌ها ساخته شد. برای بررسی میزان نسبی بیان ژن‌ها از واکنش Real Time PCR به روش رنگ غیر اختصاصی سایبرگرین استفاده شد. در این مطالعه از ژن GAPDH بعنوان کنترل داخلی استفاده گردید. از نرم‌افزار Prism، جهت تجزیه و تحلیل داده های خام، تجزیه ‌و تحلیل داده‌های حاصل از Real Time PCR و محاسبه مقدار تغییرات بیان ژن، استفاده شد.<br /><strong>نتایج:</strong> نتایج این مطالعه نشان داد که ژن UCP2 در تمامی بافت‌های بررسی شده بیان شده است و بیشترین سطح بیان در بافت عضله سردست (5/9 برابر) و راسته (5/4 برابر) و کمترین سطح بیان در بافت های چربی پشت کمر (3/1) و کبد (5/1 برابر) مشاهده شد (01/0>P).<br /><strong>نتیجه‌گیری:</strong>  با توجه به این که ژن UCP2 در همه بافت‌های مورد مطالعه بیان شده است و مقدار بیان متفاوتی در بافت‌های گوناگون داشته است، می‌توان نتیجه گرفت که این ژن در مکانیسم‌ها و فعالیت‌های مختلف نقش دارد. بنابراین، می‌توان با انجام آزمایش‌های تکمیلی و درک مکانیسم‌های مربوطه، علت تغییر بیان را یافت و در بهبود عملکرد دام‌ها با استفاده از تغییر بیان این ژن اقدام نمود. https://jab.uk.ac.ir/article_4524_dd8c2ca6ff1213bb3507a78f4835b206.pdf