دانشگاه شهید باهنر کرمان (دانشکده کشاورزی و پژوهشکده فناوری تولیدات گیاهی) و انجمن بیوتکنولوژی جمهوری اسلامی ایران مجله بیوتکنولوژی کشاورزی 2228-6705 4 1 2012 08 22 Cloning, nucleotide characterization and modeling expression of phytase gene phyC from Bacillus subtilis کلونینگ، بررسی خصوصیات ملکولی و پیش‌بینی بیان مجازی ژن فیتاز phyC از باسیلوس سابتیلیس 19 33 465 10.22103/jab.2012.465 FA حمید آریان نژاد 1 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه علوم دامی، دانشگاه فردوسی مشهد محمد رضا نصیری 2دانشیار، گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد 3دانشیار، گروه پژوهشی بیوتکنولوژی کشاورزی و دامی، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه فردوسی مشه علی اصغر اسلمی نژاد استادیار، گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد مجتبی طهمورث پور دانشیار، گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد رضا ولی زاده استاد، گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد احمد آسوده استادیار، گروه بیوشیمی، دانشکده علوم، دانشگاه فردوسی مشهد شاهرخ ‌قوتی دانشجوی دکتری، گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد Journal Article 2012 03 26 Phytase has a hydrolysis function on phytic acid which yields inorganic phosphate. Using phytase enzymes in domestic animals have a positive effect on optimal diet intake. Bacillus species can only produce thermostable alkaline phytase. Accordingly extracellular phytase gene was isolated from <em>Bacillus subtilis</em> ATCC 12711 (<em>phyc</em>) using linker primers containing restriction sites of <em>Bam</em>HI and <em>Hind</em>III. The isolated fragment was then inserted into pTZ57R/T vector for cloning and nucleotide characterization. Molecular weight of phytase protein was estimated about 42 kDa. On the other hand the model of phytase secondary structure showed the potential of thermostable characterization of enzyme فیتاز آنزیمی است که اسید فایتیک را هیدرولیز و فسفر معدنی تولید می­کند. یکی از منابع بیان­کننده آنزیم فیتاز، باکتری­ها هستند که در این میان جنس باسیلوس مهم‌ترین باکتری تولیدکننده فیتاز قلیایی مقاوم به حرارت می باشد. ژن فیتاز خارج سلولی باکتری <em>باسیلوس سابتیلیس </em><em>phyC</em> با استفاده از آغازگرهای اختصاصی و لینکردار حاوی سایت­های برشی <em>Bam</em>HI و <em>Hind</em>III جداسازی شد. به منظور انجام توالی­یابی و بررسی خصوصیات، ژن تکثیر شده <em>phyC</em> به ناقل pTZ57R/T انتقال داده شد. حضور ژن هدف در ناقل کلونینگ pTZ57R/T با استفاده از روش­ کلونی PCR و هضم آنزیمی تایید شد. ساختارهای نوکلئوتیدی و پیش­ بینی ساختار پروتئینی آنزیم فیتاز با استفاده از آنالیز توالی یابی مشخص گردید. وزن مولکولی آنزیم فیتاز 42 کیلو دالتون تخمین زده شد. نتایج این مطالعه نشان داد که به خوبی می توان نسبت به کلونینگ ژن فیتاز در وکتور کلونینگ اقدام کرد. از طرف دیگر پیش بینی مجازی آنزیم فیتاز با استفاده توالی نوکلئوتیدی و اسید آمینه، پتانسیل تولید آنزیم مقاوم به حرارت را نشان داد. https://jab.uk.ac.ir/article_465_68ce199ec2c5517597ce0a4d89620f55.pdf