اثرات بافت‌شناسی و بیوشیمیایی روغن سلولی تک‌یاخته مشتق از میکروارگانیسم‌ها بر روده موش‌های نر

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 اداره آموزش الانبار، استان الانبار، رمادی، عراق.

2 دانشکده علوم تربیتی، دانشگاه الانبار، عراق.

3 دانشکده علوم تربیتی، دانشگاه الانبار، الانبار، عراق

چکیده

هدف: این پژوهش با هدف بررسی اثرات روغن سلولی تک‌یاخته مشتق از میکروارگانیسم‌های Alcote بر ویژگی‌های بافت‌شناسی و بیوشیمیایی روده کوچک و بزرگ در موش‌های نر آلبینو انجام شد. تمرکز ویژه‌ای بر بررسی اثرات وابسته به دوز SCO بر شاخص‌های استرس اکسیداتیو و آنزیم‌های دفاع آنتی‌اکسیدانی شامل گلوتاتیون پراکسیداز و سوپراکسید دیسموتاز (SOD) صورت گرفت. هدف این بود که مشخص شود آیا مصرف SCO اثرات آنتی‌اکسیدانی مفید دارد یا بسته به دوز مصرفی موجب آسیب اکسیداتیو می‌شود.
مواد و روش‌ها: بیست‌و‌چهار موش نر سالم نژاد Sprague–Dawley در سن ۹ تا ۱۱ هفتگی و با وزن ۱۸۰ تا ۲۰۰ گرم به‌صورت تصادفی به چهار گروه (هر گروه n = 6) تقسیم شدند. گروه I به عنوان کنترل، روغن ذرت (۲ میلی‌لیتر بر کیلوگرم) دریافت کرد، در حالی که به گروه‌های II، III و IV به ترتیب روغن SCO با دوزهای ۲، ۴ و ۸ میلی‌لیتر بر کیلوگرم به‌صورت خوراکی تجویز شد. تجویزها هر ۴۸ ساعت یک‌بار به مدت ۴۵ روز انجام گرفت. پس از بیهوشی، سطوح سرمی H₂O₂، SOD و GPx با استفاده از کیت‌های رنگ‌سنجی اندازه‌گیری شدند. نمونه‌های دوازدهه و کولون در فرمالین بافری خنثی تثبیت، در پارافین قالب‌گیری و با هماتوکسیلین و ائوزین رنگ‌آمیزی شدند تا ارزیابی بافت‌شناسی انجام گیرد.
نتایج: مصرف متوسط SCO (۴ میلی‌لیتر بر کیلوگرم) به‌طور معنی‌داری موجب کاهش سطح H₂O₂ و افزایش فعالیت GPx و SOD در مقایسه با گروه کنترل شد که نشانگر بهبود دفاع آنتی‌اکسیدانی بود. در مقابل، دوز بالای SCO (۸ میلی‌لیتر بر کیلوگرم) به‌طور قابل‌توجهی سطح H₂O₂ را افزایش و فعالیت آنزیم‌های آنتی‌اکسیدانی را کاهش داد، که بیانگر القای استرس اکسیداتیو است. یافته‌های بافت‌شناسی نیز این نتایج بیوشیمیایی را تأیید کردند: موش‌هایی که ۲ و ۴ میلی‌لیتر بر کیلوگرم SCO دریافت کردند، ساختار طبیعی دوازدهه و کولون مشابه گروه کنترل داشتند، در حالی‌که در گروه دریافت‌کننده ۸ میلی‌لیتر بر کیلوگرم، ضخیم شدن دیواره عروق، نفوذ لکوسیتی، فیبروز و تخریب پرزها مشاهده شد. این یافته‌ها نشان می‌دهند که اثرات SCO وابسته به دوز است؛
نتیجه‌گیری: روغن سلولی تک‌منشأ مشتق از میکروارگانیسم‌ها اثرات دوگانه و وابسته به دوز بر سلامت روده دارد. در دوزهای متوسط، وضعیت آنتی‌اکسیدانی را بهبود داده و ساختار طبیعی بافت روده را حفظ می‌کند، که پتانسیل آن را به‌عنوان مکمل غذایی عملکردی برجسته می‌سازد. با این حال، مصرف بیش از حد آن موجب استرس اکسیداتیو و آسیب بافتی می‌شود، که بر ضرورت تعیین دوز بهینه برای استفاده ایمن و مؤثر از SCO در کاربردهای تغذیه‌ای یا درمانی تأکید دارد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Histological and biochemical effects of microbially derived single-cell oil on the intestine of male rats

نویسندگان [English]

  • Wassan D. Musa Al-Obeidi 1
  • Dhafer F. Al-Rawi 2
  • Loay H. Ali 3
1 Directorate of Education of Anbar, Anbar Governorate, Ramadi, Iraq.
2 College of Education for Pure Sciences, University of Anbar, Anbar, Iraq.
3 College of Education for Pure Sciences, University of Anbar, Anbar, Iraq.
چکیده [English]

Objective
This investigation targeted to consider the reactions of microbially derived single-cell oil (SCO) from Alcote microorganisms on the histological and biochemical profiles of the small and large intestines in male albino rats. Special emphasis was placed on the dose-dependent reactions of SCO on oxidative stress biomarkers (H₂O₂) and antioxidant defense enzymes, containing glutathione peroxidase (GPx) and superoxide dismutase (SOD). The objective was to identify whether SCO supplementation performs beneficial antioxidant reactions or incites oxidative destruction depending on the managed dose.

Materials and Methods
Twenty-four healthy male Sprague–Dawley rats, aged 9–11 weeks and weighing 180–200 g, were randomly allocated into four groups (n = 6). Group I acted as the control and obtained corn oil (2 mL/kg), while Groups II, III, and IV were managed SCO orally at doses of 2, 4, and 8 mL/kg, respectively. Treatments were given via oral gavage every 48 hours for 45 days. Serum levels of H₂O₂, SOD, and GPx were calculated applying colorimetric assay kits after anesthesia. Sections of the duodenum and colon were fixed in neutral-buffered formalin, paraffin-embedded, and stained with hematoxylin and eosin for histological evaluation.
Results
Moderate SCO supplementation (4 mL/kg) meaningfully decreased H₂O₂ levels while by growing GPx and SOD activities in comparison to the control group, indicating increased antioxidant defense. Conversely, a high SCO dose (8 mL/kg) markedly elevated H₂O₂ levels and decreased antioxidant enzyme activities, proposing oxidative stress induction. Histopathological outcomes supported these biochemical outcomes: rats given treatment with 2 and 4 mL/kg of SCO exhibited normal duodenal and colonic architecture similar to controls, whereas those receiving 8 mL/kg revealed vascular wall thickening, leukocytic infiltration, fibrosis, and villous degeneration. These outcomes demonstrate that SCO performs dose-dependent reactions, being protective at moderate doses but deleterious at high doses.

Conclusion
Microbially derived SCO exhibits dual, dose-dependent reactions on intestinal health. At moderate doses, it raises antioxidant status and holds normal intestinal histology, emphasizing its potential as a functional dietary supplement. But excessive doses incite oxidative stress and tissue destruction, emphasizing the necessity of dosage optimization for the safe and effective use of SCO in nutritional or therapeutic utilizations.

کلیدواژه‌ها [English]

  • antioxidants
  • histopathology
  • intestine
  • oxidative stress
  • single-cell oil
Aasi Al-Mehmdi, M. D., & Al-Rawi, D. F. J. (2019). Determination of optimal conditions for the production of single cell protein (SCP) by Pseudomonas aeruginosa bacteria using hydrocarbon residues (used motor oil). Biochemical and Cellular Archives, 19(2), 4323–4329. https://www.connectjournals.com/pages/articledetails/toc030592
Abd Manan, N., Mohamed, N., & Shuid, A. N. (2012). Effects of low-dose versus high-dose γ-tocotrienol on bone cells exposed to hydrogen peroxide-induced oxidative stress and apoptosis. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 2012, 680834. https://doi.org/10.1155/2012/680834
Abd-Al Hussien, S. D., & Al-Rawi, D. F. J. (2020). Using paper waste and local bacterial isolates to produce biomass and cellulase enzyme: A study on waste recycling. Indian Journal of Forensic Medicine and Toxicology, 14(4), 1900–1906. https://doi.org/10.37506/ijfmt.v14i4.11822
Al-Obeidi, W. D. M., Ali, L. H., & Al-Rawi, D. F. (2024). The effects of single cell oil (sco) produced from bacillus subtilus on certain histological and physiological changes in laboratory rats. Anbar Journal of Agricultural Sciences, 22(1), 429-454. https://ajas.uoanbar.edu.iq/article_183744.html
Al-Obeidi, W. D. M., Al-Rawi, D. F., & Ali, L. H. (2023). Production of single-cell oil from a local isolate Bacillus subtilis using palm fronds. International Journal of Biomaterials, 2023, 8882842. https://doi.org/10.1155/2023/8882842
Armenta, R. E., & Valentine, M. C. (2013). Single-cell oils as a source of omega-3 fatty acids: An overview of recent advances. Journal of the American Oil Chemists’ Society, 90, 167–182. https://doi.org/10.1007/s11746-012-2154-3
Budzianowski, W. M. (2017). High-value low-volume bioproducts coupled to bioenergies with potential to enhance business development of sustainable biorefineries. Renewable and Sustainable Energy Reviews, 70, 793–804. https://doi.org/10.1016/j.rser.2016.11.260
Carvalho, A. K., Rivaldi, J. D., Barbosa, J. C., & de Castro, H. F. (2015). Biosynthesis, characterization and enzymatic transesterification of single cell oil of Mucor circinelloides – A sustainable pathway for biofuel production. Bioresource Technology, 181, 47–53. https://doi.org/10.1016/j.biortech.2014.12.110
Cohen, Z., & Ratledge, C. (2005). Single cell oils: Microbial and algal oils. 2nd Edition Academic Press and AOCS Press. https://www.amazon.com/Single-Cell-Oils-Microbial-Algal/dp/1893997731
Di Meo, S., & Venditti, P. (2020). Evolution of the knowledge of free radicals and other oxidants. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2020, 9829176. https://doi.org/10.1155/2020/9829176
Fakas, S., Papanikolaou, S., Galiotou-Panayotou, M., Komaitis, M., and Aggelis, G. (2009) Biochemistry and biotechnology of single cell oil. in New Horizons in Biotechnology (Pandey, A., and Larroche, C. eds.), Asiatech Publishers. pp 38-60 https://www.academia.edu/614453/Biochemistry_and_biotechnology_of_single_cell_oil
Gulcin, İ. (2020). Antioxidants and antioxidant methods: An updated overview. Archives of Toxicology, 94, 651–715. https://doi.org/10.1007/s00204-020-02689-3
Khalaf, N. Z., Al-Rawi, D. F., & Al-Ani, M. Q. J. (2023). Investigation of efficient local bacterial isolates producing L-methioninase. Vol. 55 No. 4 (2023): Journal of Communicable Diseases  https://doi.org/10.24321/0019.5138.202350
Madani, M., Enshaeieh, M., & Abdoli, A. (2017). Single cell oil and its application for biodiesel production. Process Safety and Environmental Protection, 111, 747–756. https://doi.org/10.1016/j.psep.2017.08.027.
Martínez, E. J., Raghavan, V., González-Andrés, F., & Gómez, X. (2015). New Biofuel Alternatives: Integrating Waste Management and Single Cell Oil Production. International Journal of Molecular Sciences, 16(5), 9385-9405. https://doi.org/10.3390/ijms16059385
Nikolova, C., & Gutierrez, T. (2020). Use of microorganisms in the recovery of oil from recalcitrant oil reservoirs: Current state of knowledge, technological advances and future perspectives. Frontiers in Microbiology, 10, 2996. https://doi.org/10.3389/fmicb.2019.02996
Ochsenreither, K., Glück, C., Stressler, T., Fischer, L., & Syldatk, C. (2016). Production strategies and applications of microbial single cell oils. Frontiers in Microbiology, 7, 1539. https://doi.org/10.3389/fmicb.2016.01539
Pérez-Rosés R, Risco E, Vila R, Peñalver P, Cañigueral S. Biological and Nonbiological Antioxidant Activity of Some Essential Oils. J Agric Food Chem. 2016 Jun 15;64(23):4716-24. doi: 10.1021/acs.jafc.6b00986.
Rajbongshi A, Gogoi SB. A review on anaerobic microorganisms isolated from oil reservoirs. World J Microbiol Biotechnol. 2021 Jun 2;37(7):111. doi: 10.1007/s11274-021-03080-9.
Ratledge, C. (2013). Microbial oils: an introductory overview of current status and future prospects. OCL, 20 6 (2013) D602. https://doi.org/10.1051/ocl/2013029
Razzaq, Z. U., Khan, M. K. I., Maan, A. A., & Rahman, S. U. (2020). Characterization of single cell protein from Saccharomyces cerevisiae for nutritional, functional and antioxidant properties. Food Measure 14, 2520–2528 (2020). https://doi.org/10.1007/s11694-020-00498-x
Recknagel, R. O., Glende, E. A., & Britton, R. S. (2020). Free radical damage and lipid peroxidation. In Hepatotoxicology (pp. 401–436). CRC Press.  10.1201/9780367812041-9
Sayegh, F., Elazzazy, A., Bellou, S. et al. Production of polyunsaturated single cell oils possessing antimicrobial and anticancer properties. Ann Microbiol 66, 937–948 (2016). https://doi.org/10.1007/s13213-015-1176-0
Spalvins, Kriss, et al. "Single Cell Oil Production from Waste Biomass: Review of Applicable Industrial By-Products" Environmental and Climate Technologies, vol. 23, no. 2, Riga Technical University, 2019, pp. 325-337. https://doi.org/10.2478/rtuect-2019-0071
Suvarna, K. S., Layton, C., & Bancroft, J. D. (2012). Bancroft's theory and practice of histological techniques (7th ed.). Churchill Livingstone. https://www.amazon.com.au/Bancrofts-Theory-Practice-Histological-Techniques/dp/0702042269
Thakur V, Baghmare P, Verma A, Verma JS, Geed SR. Recent progress in microbial biosurfactants production strategies: Applications, technological bottlenecks, and future outlook. Bioresour Technol. 2024 Sep;408:131211. doi: 10.1016/j.biortech.2024.131211.